蜥蜴是變溫動物，在溫帶及寒帶生活的蜥蜴於冬季進入休眠狀態，表現出季節活動的變化。在熱帶生活的蜥蜴，由於氣候溫暖，可終年進行活動。但在特別炎熱和乾燥的地方，也有夏眠的現象，以度過高溫乾燥和食物缺乏的惡劣環境。可分為白晝活動、夜晚活動與晨昏活動三種類型。不同活動類型的形成，主要取決於食物物件的活動習性及其他一些因素。
個體蜥蜴的活動範圍很局限。樹棲蜥蜴往往只在幾株樹之間活動。據研究過的幾種地面活動的蜥蜴，如多線南蜥等，活動範圍平均在1，000平方米左右。
大多數蜥蜴吃動物性食物，主要是各種昆蟲。壁虎類（Gekkonids）夜晚活動，以鱗翅目等昆蟲為食物。體型較大的蜥蜴如大壁虎（蛤蚧，Gekkogecko）也可以小鳥，其他蜥蜴為食物。巨蜥（Varanus）則可吃魚、蛙甚至捕食小型哺乳動物。也有一部分蜥蜴如鬣蜥（Agama）以植物性食物為主。由於大多數種類捕吃大量昆蟲，蜥蜴在控制害蟲方面所起的作用是不可低估的。很多人以為蜥蜴是有毒動物，這是不對的。全世界6000種蜥蜴中，已知只有兩種有毒毒蜥，隸屬於毒蜥科（Helodermatidae），且都分佈在北美及中美洲。
