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蘭花花葉病毒的檢測

由於病毒過於微小, 如何檢測病毒成了一大難題。 一般需要電子顯微鏡才能進行觀測, 而且要求操作者具有很高的技術水準。 有沒有更簡單的方法呢?酶聯免疫斑點法(ELISpot)最初用於檢測分泌抗原特異性抗體的個體B細胞。 以後該方法不斷改進, 用於檢測分泌某一細胞因數或其它抗原的個體細胞。 ELISpot採用可定量的夾心ELISA方法。 抗待測組分的特異性抗體預先包被在聚偏二氟乙烯微孔板上。 把經適當刺激的細胞加到孔中, 微孔板放在37 CO2培養箱中孵育一段時間, 在孵育期內, 已包被的抗體(離分泌細胞很近)和分泌的待測組分結合。
在洗滌掉細胞和未結合的組分之後, 生物素化的特異性多抗加到孔中。 經過洗滌去除未結合的生物素化抗體, 加入鹼性磷酸酶偶聯的鏈親和素。 未結合的酶在洗滌去除後, 加入底物溶液(BCIP/NBT)。 黑藍色的沉澱即在細胞因數出現的位置形成並表現為斑點。 每個斑點代表單個分泌待測組分的細胞。 斑點多少可在自動化的ELISpot讀數系統上計數或人工地在立體顯微鏡上計數。 黃瓜花葉病毒(CMV)侵染番茄、黃瓜和其他作物, 常常造成嚴重的損失。 如果能拔除病株並帶出田外處理掉, 就能阻止CMV的傳播蔓延, 關鍵要有一種快速、準確的診斷方法, 能及時鑒定出帶CMV的植株。 最近, 美國農業研究局的科學家研究出一種快速、有效的檢測方法,
能準確無誤地檢測出當地及外來的CMV。 他們把培養的CMV抗體塗在新切的葉片或莖上, 會產生像紙膜一樣的特殊膜層, 再用含有抗體的溶液處理這個膜層, 在接觸點立即出現顏色變化, 表明有CMV病毒存在。 該項新技術能檢測CMV病毒或適於尋找專化性病毒亞組。 有了這種早期發現病株的檢測方法, 就能及時拔除病株, 杜絕侵染來源, 達到有效防治的目的。
現在這種方法也運用到蘭花花葉病毒的檢測上。 如美國的Agdia ELISA系列產品, 包括完整的試劑盒(PathoScreen Kits), 試劑組和單獨組分。 為確保產品品質, Agdia對全部產品進行質控, 同時在檢疫服務部使用自己的產品, 所以Agdia能夠監測產品在要求最嚴格實驗條件下的表現以便提供最高品質的產品。
能有效監測蘭花花葉病毒。
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