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草履蟲的培養方法

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草履蟲屬於原生動物門的纖毛綱, 是一類體型較大的原生動物, 在自然界廣泛分佈, 又容易採集和培養, 是觀察研究原生動物的好材料。 草履蟲種類很多, 其中體型最大和最常見的是大草履蟲(Paramecium caudatum)。

1.採集

草履蟲通常生活在水流速度不大的水溝、池塘和稻田中, 大多積聚在有機質豐富, 光線充足的水面附近。 當水溫在14~22℃時, 繁殖最旺盛, 數目最多、草履蟲的這些習性, 是確定採集地點和方法的重要依據。

(1)到水溝、池塘採集草履蟲。 水溝和池塘是草履蟲的主要生活場所。 在氣候溫暖的季節,

到水質沒有污染的水溝、池塘岸邊, 選擇枯枝落葉多的地方, 用廣口瓶沿水面採集池水, 這樣的池水往往含有許多草履蟲。 為了更有把握, 可在不同地點多采幾瓶。 採集後, 廣口瓶內要放置少許水草, 瓶口不要加蓋, 以免草履蟲因缺氧而窒息死亡。

回到實驗室後, 要把盛有池水的廣口瓶放在溫暖、明亮、陽光又不直射的地方, 使瓶中的革履蟲迅速繁殖。 三五天以後, 對著光線用肉眼觀察, 如果看到水中有許多小白點在不停地遊動, 很可能就是草履蟲。 這時, 用吸管吸取一滴帶有小白點的水, 放在載玻片上, 用顯微鏡進行觀察, 在視野中會看到各種微小生物。 如果發現有象倒置的草鞋一樣的小動物, 不停地螺旋運動,

那就是草履蟲, 採集就成功了。

(2)到稻田採集草履蟲。 在稻田灌水期間, 尋找田中的舊稻茬, 用廣口瓶在稻茬附近取水, 隨後放進幾根舊稻草。 這樣的水中往往會有許多草履蟲。 返回實驗室後, 放在溫暖明亮處, 三五天后, 用顯微鏡檢查是否有草履蟲存在。

(3)從新鮮稻草上採集草履蟲。 當環境變得乾旱或寒冷時, 草履蟲能向身體表面分泌一層蛋白質的薄膜, 蟲體不吃不動, 進入休眠狀態。 這種狀態叫作包囊。 在稻田水抽幹時, 草履蟲便形成許多包囊, 附著在稻草近根部的幾節莖上。 因此, 可選取新鮮稻草近根部的幾節, 剪成3~4釐米長的小段, 放入廣口瓶中, 注入清水, 放在明亮溫暖處, 一周以後, 用顯微鏡檢查是否有草履蟲。

2.配製培養液

草履蟲的食物主要是細菌。 為了培養繁殖草履蟲, 必須配製含有大量細菌的培養液。 培養液的配製方法通常有以下兩種。

(1)稻草培養液。 取新鮮潔淨的稻草, 去掉上端和基部的幾節, 將中部稻莖剪成3~4釐米長的小段, 按1克稻草加清水100毫升的比例, 將稻草和清水放入大燒杯中, 加熱煮沸10~15分鐘, 當液體呈現黃褐色時停止加熱。 這樣的液體, 由於加熱煮沸, 只留下了細菌芽孢, 其它生物已均被殺死, 為培養草履蟲創造了良好條件。 為了防止空氣中其它原生動物的包囊落入和蚊蟲產卵, 燒杯口要用雙層紗布包嚴。 然後放置在溫暖明亮處進行細菌繁殖。

經過3~4天, 稻草中的枯草桿菌的芽孢開始萌發, 並依靠稻草液中的豐富養料迅速繁殖,

液體逐漸混濁, 等到大量細菌在液體表面形成了一層灰白色薄膜時, 稻草培養液便製成了。 由於草履蟲喜歡微鹼性環境, 如果培養液呈酸性, 可用1%碳酸氫鈉調至微鹼性, 但pH值不能大於7.5。

(2)麥粒培養液。 將5克麥粒(大麥、小麥均可)放入1000毫升清水中, 加熱煮沸, 煮到麥粒脹大裂開為止。 然後在溫暖明亮處放置3~4天, 便製成了麥粒培養液, 此時培養液中已繁殖有大量的細菌。

3.接種

接種是指將採集來的草履蟲轉移到培養液的過程。 接種草履蟲時必須提純, 否則會混入其它小動物。 這不但會影響草履蟲的純度, 而且一旦混入草履蟲的天敵水輪蟲(Rotaria), 將會使培養液中草履蟲的數量急劇下降。

接種時, 先將含有草履蟲的水液吸到表面皿中,

再將表面皿置於低倍顯微鏡或解剖鏡下檢查, 發現有草履蟲後, 用口徑不大於0.2毫米的微吸管, 將表面皿中草履蟲逐個吸出, 接種到培養液的廣口瓶中進行繁殖。

如果要培養純系的草履蟲, 可按上述方法, 在顯微鏡或解剖鏡下, 從表面皿中吸出一個草履蟲, 放入盛有少量培養液的凹玻片中, 上面再覆蓋一片凹玻片, 用以防止培養液乾燥。 待草履蟲經過橫分裂達到20~30個個體時, 移到培養液的廣口瓶中進行繁殖。

4.培養

(1)將接種有草履蟲的培養液的廣口瓶, 放在溫暖明亮處進行培養, 培養液的容器口要用紗布包嚴。 大約1周後, 就會有大量草履蟲出現。

(2)如果是長期培養, 就要定期更新培養液。 這是因為隨著蟲體大量繁殖, 培養液中營養逐漸減少,而蟲體排出代謝物卻又不斷增加,這就會引起草履蟲數量減少甚至全部死亡。因此在培養過程中,每隔3天左右須更新一次培養液。更新時,用吸管從廣口瓶底部吸去培養液及沉澱物,每次要吸去一半培養液,加入等量新鮮培養液。這樣可使草履蟲長期得到保存。

培養液中營養逐漸減少,而蟲體排出代謝物卻又不斷增加,這就會引起草履蟲數量減少甚至全部死亡。因此在培養過程中,每隔3天左右須更新一次培養液。更新時,用吸管從廣口瓶底部吸去培養液及沉澱物,每次要吸去一半培養液,加入等量新鮮培養液。這樣可使草履蟲長期得到保存。

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